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  怎样解决液相色谱保留时间的漂移?为什么会漂移?

  保留时间飘移可能的原因有:

  1 柱子没有达到平衡;

  解决:

  平衡更长的时间来解决。

  2 实验环境温度发生变化;保留时间和温度有很大的关系,一般温度高,出峰快。

  解决:

  这里的温度不仅指柱温,其实还包括流动相温度。柱温一般都有规定,用柱温箱就可以平衡了,但是流动相温度没有规定,很多人不知道也要保持不变。在空调房里做,保持住室温不变,一般会好很多。

  3 流动相比例发生变化;

  解决:

  配置时尽量混合均匀;配置时尽量保证比例没有偏离;使用时尽量保证导管接口处不挥发泄漏;长时间不用的要密封,废弃不用。

  4 长期使用后柱子损耗;

  解决:

  重新,再生柱子,或更换新的。

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  你要如何锁定保留时间?

  所谓保留时间锁定,就是使特定化合物的保留时间在不同仪器、不同色谱柱(但标称固定相和相比相同)之间保持不变。为了讨论这一技术的基本原理,要从影响保留时间重现性的因素说起!

  决定保留时间的因素都有啥?

  化合物的性质、固定液的性质和操作条件;

  如果前两个因素不变(对于特定的化合物和GC仪器系统,这当然是成立的);

  只有操作条件会变,即,载气流速、柱温、毛细管柱规格和检测器类型等;

  载气控制:

  对于同种载气来说,压力和流速是影响保留时间的参数;

  不同厂家的压力表和流量计的制造精度有所不同,故当不同仪器的压力和流量显示完全一致时,柱内流量也不尽相同;

  现在有了EPC,这一问题基本得到了解决;

  虽然同一厂家制造的EPC不可能每项都严格一致,但差异微小,通过压力的自动调节完全可以补偿这一差异。

  温度控制:

  保留时间对温度极为敏感,过去采用温度计测量柱温时,重现性显然有问题。现在都用热敏元件与电子线路来控制温度,精度大为提高。不同仪器间温度重现性令人满意。即使有0.5℃的温度差异,我们仍能通过调节柱前压的办法来使保留时间达到重现。

  色谱柱规格:

  一、不同厂商的色谱柱,尽管标称规格一致,但难免有内径的不均匀、固定液膜厚的变化、以及柱长的不,这些都会造成保留时间的波动。

  二、同一根色谱柱在使用过程中会发生变化,比如,重新安装或因柱污染而截去1~2cm后,若其他操作条件不变,保留时间就不能重现了。

  目前,同一厂商的色谱柱制造重现性已相当高,而不同厂家的色谱柱尚不能完全重现,尤其是极性柱。但我们如果采用同一厂家的色谱柱,就可基本解决这一问题。至于色谱柱长度的变化,可以通过调节柱前压来补偿。

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  检测器类型:

  常规检测器:

  常压下工作;

  MS:

  高真空下工作;

  AED:

  高于大气压(如,10kPa)下工作。这样,当比较常规检测器和MS或AED所得结果时,即使柱前压严格一致,柱压降也不同,保留时间就不能重现。采用EPC时,就很容易通过调节压力使柱压降保持相同。

  通过上述分析我们可以得出结论,只要仪器的载气和温度控制精度足够高,只要色谱柱标称规格一致,就可以通过调节柱前压的方法来补偿操作参数的微小变化,从而实现保留时间的重现,这就是RTL的基础。

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